การใช้ชุดตรวจวิเคราะห์ปริมาณฟลาโวนอยด์ร่วมกับ Spectrophotometer
Question
ฉันมี Flavonoids Content Assay Kit แต่ไม่มีเครื่อง Microplate Reader อยากทราบว่าสามารถใช้ชุดตรวจวิเคราะห์นี้กับเครื่อง Spectrophotometer มาตรฐานแทนได้หรือไม่?
Answer
ชุดตรวจวิเคราะห์ปริมาณฟลาโวนอยด์ (Flavonoids Content Assay Kit) เป็นการตรวจวิเคราะห์แบบ Colorimetric ซึ่งวัดค่าการดูดกลืนแสง (Absorbance) ของสารละลายที่เกิดขึ้นที่ความยาวคลื่นเฉพาะ (โดยทั่วไปประมาณ 510 nm)
โดยหลักการแล้ว เครื่องมือใดๆ ที่สามารถวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นที่กำหนดก็สามารถใช้ได้ รวมถึงเครื่อง Spectrophotometer มาตรฐาน (ที่ใช้ Cuvette) และเครื่อง Microplate Reader
ข้อควรพิจารณาที่สำคัญสำหรับการใช้ Spectrophotometer:
- การปรับปรุงวิธีการ (การเพิ่มปริมาตร): โปรโตคอลของชุดคิทมักจะถูกปรับให้เหมาะสมกับปริมาตรที่น้อยของ Microplate Reader (เช่น 100-300 µL ต่อหลุม) หากคุณใช้ Spectrophotometer มาตรฐาน คุณจะต้อง เพิ่มปริมาตรของสารตั้งต้นในการทำปฏิกิริยา ตามสัดส่วน เพื่อให้แน่ใจว่ามีสารละลายเพียงพอที่จะเติม Cuvette มาตรฐาน (ซึ่งปกติใช้ปริมาตร 1 mL ขึ้นไป)
- ความยาวคลื่น: ตรวจสอบให้แน่ใจว่า Spectrophotometer ของคุณสามารถอ่านค่าที่ความยาวคลื่นที่ระบุในคู่มือของชุดคิทได้อย่างถูกต้อง
ดังนั้น คำตอบคือ สามารถใช้ Spectrophotometer มาตรฐานได้ แต่คุณต้องตรวจสอบและอาจปรับเปลี่ยนปริมาตรของสารตั้งต้นในโปรโตคอลของชุดคิทให้เหมาะสมกับขนาดของ Cuvette ที่คุณใช้