4-Nitrophenyl formate ใช้เป็นรีเอเจนต์ในการสังเคราะห์อินทรีย์ โดยเฉพาะในปฏิกิริยาเอสเทอริฟิเคชันเพื่อเตรียมเอสเทอร์และอนุพันธ์อื่น ๆ ทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นสำคัญในการผลิตยาและสารเคมีทางการเกษตร ในเคมีวิเคราะห์และชีวเคมี ใช้เป็นสารตั้งต้นแบบโครโมเจนิกสำหรับทดสอบเอนไซม์เอสเทอเรสและไลเพส โดยการไฮโดรไลซิสจะปล่อย 4-ไนโตรฟีนูเลต ซึ่งมีสีเปลี่ยนแปลงตาม pH (เหลืองที่ pH กลางถึงด่าง) สำหรับการตรวจวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีและเป็นตัวบ่งชี้ในศึกษาการทำงานของเอนไซม์ กลุ่มไนโตรของมันมีประโยชน์ในการศึกษาการถ่ายโอนอิเล็กตรอนและปฏิกิริยาออกซิเดชัน-รีดักชัน นอกจากนี้ยังใช้ในการพัฒนาสีย้อมและเม็ดสีเนื่องจากสามารถสร้างสารประกอบสีที่เสถียรได้