ใช้เป็นยาปฏิชีวนะหลักในทางการแพทย์สัตว์ โดยเฉพาะในปศุสัตว์ เช่น วัว หมู และสัตว์ปีก เพื่อรักษาการติดเชื้อแบคทีเรีย รวมถึงโรคทางเดินหายใจ การติดเชื้อทางเดินปัสสาวะ และการติดเชื้อในระบบทางเดินอาหารบางชนิด มักให้ทางอาหาร น้ำ หรือฉีด นอกจากนี้ยังใช้ในเกษตรกรรมเพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตและป้องกันโรคในสภาวะการเลี้ยงที่แออัด ในมนุษย์ เคยใช้ในอดีตสำหรับรักษาการติดเชื้อเช่น สิว คลามีเดีย และโรคริกเก็ตเซียล แม้ว่าปัจจุบันการใช้จะจำกัดเนื่องจากความดื้อยาและมีเทรไซคลินใหม่ๆ ที่ดีกว่า บางครั้งใช้ในงานวิจัยสำหรับระบบการแสดงออกของยีนที่ควบคุมด้วยเทรไซคลิน อย่างไรก็ตาม การใช้ต้องระมัดระวังเพื่อป้องกันการดื้อยาและตกค้างในผลิตภัณฑ์สัตว์