ใช้ในการรักษาการติดเชื้อแบคทีเรียที่ไวต่อเพนิซิลลิน โดยเฉพาะเชื้อสแตฟิโลคัคคัส ซึ่งดื้อต่อเพนิซิลลินชนิดธรรมดา เนื่องจากออกซาซิลลินสามารถต้านเอนไซม์เบต้า-แลคทามาสที่แบคทีเรียสร้างขึ้นได้ จึงนิยมใช้ในกรณีติดเชื้อทางผิวหนัง กระดูก ข้อ หรือกระแสเลือดที่เกิดจากสแตฟิโลคัคคัส แอรูอัสที่ผลิตเบต้า-แลคทามาส ยาออกซาซิลลินมักให้ทางฉีดเข้ากล้ามเนื้อหรือให้ทางหลอดเลือด ขึ้นอยู่กับความรุนแรงของการติดเชื้อ