Viomycin ใช้หลักๆ เป็นยาปฏิชีวนะในการรักษาวัณโรค โดยเฉพาะกรณีที่การติดเชื้อดื้อยาระดับแรก เช่น isoniazid และ rifampin โดยยาจะยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีนใน Mycobacterium tuberculosis ทำให้แบคทีเรียไม่สามารถเจริญเติบโตและเพิ่มจำนวนได้ เนื่องจากมีพิษที่อาจเกิดขึ้น เช่น ทำลายไตและสูญเสียการได้ยิน จึงสงวนไว้สำหรับวัณโรคดื้อยาหลายชนิด (MDR-TB) และให้ภายใต้การดูแลทางการแพทย์อย่างเข้มงวด Viomycin มักใช้ร่วมกับยาปฏิชีวนะอื่นๆ เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพและลดความเสี่ยงการเกิดดื้อยา การใช้ลดลงด้วยการเกิดยาใหม่ที่毒น้อยกว่า แต่ยังคงเป็นตัวเลือกสำคัญในกรณียากลำบากของวัณโรคดื้อยา