ใช้สารละลายบัฟเฟอร์อะซิเตตในงานที่ต้องการควบคุมค่าความเป็นกรด-เบส (pH) ให้อยู่ในช่วงประมาณ 3.6 ถึง 5.6 ซึ่งเหมาะสำหรับระบบชีวเคมีหลายประเภท เช่น การศึกษาการทำงานของเอนไซม์ที่ไวต่อการเปลี่ยนแปลง pH การเตรียมตัวอย่างในห้องปฏิบัติการ และการวิเคราะห์ทางชีวภาพต่างๆ นอกจากนี้ยังใช้ในกระบวนการแยกสาร เช่น การอิเล็กโทรโฟรีซิสของโปรตีนหรือกรดนิวคลีอิก รวมถึงใช้ในผลิตภัณฑ์ยาและเครื่องสำอางเพื่อรักษาความเสถียรของสูตร และลดการระคายเคืองต่อผิวหนังหรือเยื่อบุ