สิ่งเจือปนของไนอาซินที่พบในไนอาซินาไมด์อาจทำให้เกิดอาการหน้าแดงบนผิวหนังได้ บริการวิเคราะห์ HPLC ให้ปริมาณไนอาซินในตัวอย่าง

สิ่งเจือปนของไนอาซินที่พบในไนอาซินาไมด์อาจทำให้เกิดอาการหน้าแดงบนผิวหนังได้

บริการวิเคราะห์ HPLC ให้ปริมาณไนอาซินในตัวอย่าง

มาตรการ:

การจัดเตรียมตัวอย่าง:

1. ชั่งน้ำหนักตัวอย่างไนอาซินาไมด์ในปริมาณที่ทราบอย่างแม่นยำ
2. ละลายตัวอย่างในตัวทำละลายที่เหมาะสม เช่น ส่วนผสมของน้ำและเมทานอลหรืออะซิโตไนไตรล์ ขึ้นอยู่กับความสามารถในการละลายของตัวอย่าง
3. กรองสารละลายผ่านตัวกรองเมมเบรน (เช่น 0.45 μm) เพื่อกำจัดอนุภาคใดๆ

เงื่อนไขโครมาโตกราฟี:

1. ระบบ HPLC: ใช้ระบบโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงที่ติดตั้งเครื่องตรวจจับ UV-Vis หรือเครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด (DAD)
2. คอลัมน์: เลือกคอลัมน์ C18 แบบเฟสกลับกัน (เช่น 4.6 มม. × 250 มม., ขนาดอนุภาค 5 μm) หรือคอลัมน์ที่เทียบเท่าซึ่งเหมาะสำหรับการแยกไนอาซินและไนอาซินาไมด์
3. เฟสเคลื่อนที่: เตรียมองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่ที่เหมาะสม โดยทั่วไปจะเป็นส่วนผสมของน้ำและตัวทำละลายอินทรีย์ เช่น เมทานอลหรืออะซิโตไนไตรล์ องค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่อาจเป็นแบบไอโซเครติค (องค์ประกอบคงที่) หรือเกรเดียนต์ (องค์ประกอบที่แปรผันตามเวลา)
4. อัตราการไหล: ปรับอัตราการไหลตามขนาดคอลัมน์และเวลาการวิเคราะห์ที่ต้องการ โดยทั่วไปจะอยู่ระหว่าง 0.8 ถึง 1.5 มล./นาที
5. ความยาวคลื่นการตรวจจับ: ตั้งค่าความยาวคลื่นการตรวจจับให้เป็นค่าที่เหมาะสมสำหรับไนอาซินและไนอาซินาไมด์ โดยทั่วไปจะอยู่ที่ประมาณ 260-270 นาโนเมตร
6. อุณหภูมิของคอลัมน์: รักษาคอลัมน์ไว้ที่อุณหภูมิคงที่ โดยปกติจะอยู่ระหว่าง 25°C ถึง 35°C เพื่อให้แน่ใจว่ามีเวลาเก็บรักษาและรูปร่างสูงสุดสม่ำเสมอ

การเตรียมสารละลายมาตรฐาน:

1. เตรียมสารละลายมาตรฐานของไนอาซินและไนอาซินาไมด์ที่ความเข้มข้นที่ทราบต่างกันในตัวทำละลายเดียวกันกับที่ใช้สำหรับการเตรียมตัวอย่าง
2. กรองสารละลายมาตรฐานผ่านตัวกรองเมมเบรน (เช่น 0.45 μm) ก่อนฉีดเข้าสู่ระบบ HPLC

การวิเคราะห์โครมาโตกราฟี:

1. ฉีดสารละลายมาตรฐานที่ผ่านการกรองในปริมาณที่เหมาะสม (เช่น 10-20 μL) เข้าไปในระบบ HPLC
2. บันทึกเวลาการเก็บรักษาและพื้นที่จุดสูงสุดของไนอาซินและไนอาซินาไมด์ในสารละลายมาตรฐาน
3. สร้างเส้นโค้งการสอบเทียบโดยการวางแผนพื้นที่พีคเทียบกับความเข้มข้นที่สอดคล้องกันของมาตรฐาน
4. ฉีดสารละลายตัวอย่างที่กรองแล้วเข้าไปในระบบ HPLC ภายใต้เงื่อนไขโครมาโตกราฟีเดียวกันกับมาตรฐาน
5. ระบุพีคที่สอดคล้องกับไนอาซินและไนอาซินาไมด์ตามเวลาการเก็บรักษาเมื่อเทียบกับมาตรฐาน
6. หาปริมาณไนอาซินในตัวอย่างไนอาซินาไมด์โดยการเปรียบเทียบพื้นที่พีคของไนอาซินกับเส้นโค้งการสอบเทียบ