ไอโซลูมินอลเป็นสารเคมีที่ใช้อย่างแพร่หลายในงานเคมีแสง (chemiluminescence) โดยเฉพาะในงานทดสอบทางชีวเคมีและการวินิจฉัยโรค ทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นเรืองแสงสำหรับตรวจจับกิจกรรมของเพอร์ออกซิเดส ทำให้มีคุณค่าในอิมมูโนแอสเซย์ เช่น ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) เพื่อระบุโปรตีนหรือแอนติบอดีเฉพาะ ความสามารถในการปล่อยแสงเมื่อถูกออกซิเดชันยังถูกนำมาใช้ในนิติวิทยาศาสตร์สำหรับตรวจหาเลือดเปื้อน แม้ในตัวอย่างที่เจือจางหรือเก่า นอกจากนี้ ไอโซลูมินอลยังถูกใช้ในงานวิจัยเพื่อศึกษาความเครียดจากออกซิเดชันและอนุมูลอิสระออกซิเจน (ROS) ในระบบชีวภาพ ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับความเสียหายของเซลล์และกลไกของโรค ความไวและความหลากหลายทำให้เป็นเครื่องมือสำคัญทั้งในสถานพยาบาลและงานวิทยาศาสตร์