ใช้เป็นสารตั้งต้นโครโมเจนิกในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะสำหรับตรวจจับกิจกรรมของอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส เมื่อถูกเอนไซม์ตัด จะปล่อย 4-ไนโตรฟีนอล ซึ่งผลิตสีเหลืองที่วัดได้ที่ 405 nm ในการวิเคราะห์สเปกโตรโฟโตเมตรี ทำให้มีคุณค่าในการวินิจฉัยทางคลินิก อิมมูโนแอสเซย์ (เช่น ELISA) และการวิจัยทางชีวเคมีสำหรับการกำหนดปริมาณกิจกรรมเอนไซม์ การพัฒนาสีของมันเสถียรและอ่อนไหว อนุญาตให้ตรวจจับความเข้มข้นเอนไซม์ต่ำ นอกจากนี้ยังใช้ใน screening ขนาดใหญ่และการศึกษากิเนติกเนื่องจาก kinetics การตอบสนองที่เชื่อถือได้และความง่ายในการตรวจจับ