บิส(4-ไนโตรฟีนิล) ฟอสเฟต ถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นสารตั้งต้นในงานทดสอบเอนไซม์ โดยเฉพาะในการศึกษากิจกรรมของฟอสฟาทาสและฟอสโฟไดเอสเทอเรส มันทำหน้าที่เป็นสารประกอบโมเดลเพื่อวัดจลนศาสตร์ของเอนไซม์และการยับยั้ง ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกของเอนไซม์และเป้าหมายบำบัดที่เป็นไปได้ ในการวิจัยทางชีวเคมี มันช่วยในการตรวจจับและวัดปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์เนื่องจากการปล่อย 4-ไนโตรฟีนอล ซึ่งสามารถตรวจสอบด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรีได้ง่าย นอกจากนี้ ยังใช้ในการพัฒนาเซ็นเซอร์ชีวภาพและเครื่องมือวินิจฉัยสำหรับตรวจจับกิจกรรมเอนไซม์ในตัวอย่างชีวภาพ บทบาทของมันในการทำความเข้าใจเส้นทางสัญญาณเซลล์และการเผาผลาญฟอสเฟต ยังเน้นย้ำถึงความสำคัญในงานศึกษาทางชีวเคมีและชีวการแพทย์