ไฮยาลูโรนิเดสถูกใช้อย่างแพร่หลายในสาขาการแพทย์และความงาม เนื่องจากความสามารถในการย่อยสลายกรดไฮยาลูรอนิก ในทางการแพทย์ ใช้เพื่อเพิ่มการดูดซึมและการกระจายของยาที่ฉีด เช่น ยาชาเฉพาะที่ เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพและลดความไม่สบาย นอกจากนี้ยังใช้ในศัลยกรรมตาเพื่อช่วยให้ยาชาแพร่กระจาย และในการรักษาภาวะขาดไฮยาลูโรนิเดส หรือเพื่อย้อนกลับผลของสารเติมเต็มกรดไฮยาลูรอนิกในกรณีมีภาวะแทรกซ้อน ในกระบวนการความงาม ช่วยละลายสารเติมเต็มผิวหนังที่ใช้กรดไฮยาลูรอนิก เพื่อปรับหรือแก้ไข นอกจากนี้ยังช่วยในการให้สารน้ำใต้ผิวหนัง โดยเพิ่มการดูดซึมของของเหลวในกรณีขาดน้ำหรือการให้สารน้ำใต้ผิวหนัง