สารนี้ถูกใช้อย่างกว้างขวางในด้านชีววิทยาโมเลกุลและจุลชีววิทยาเพื่อเป็นสารตั้งต้นในการทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์ β-galactosidase โดยเมื่อเอนไซม์นี้ทำปฏิกิริยากับสารดังกล่าว จะเกิดการปลดปล่อยฟลูออเรสเซอิน ซึ่งเป็นสารเรืองแสงที่สามารถตรวจจับได้ง่ายด้วยเครื่องมือทางวิทยาศาสตร์ การประยุกต์ใช้หลัก ๆ ได้แก่: 1. การตรวจสอบการแสดงออกของยีน: ใช้เป็นตัวบ่งชี้ในการศึกษาการควบคุมการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ β-galactosidase 2. การคัดเลือกเซลล์: ช่วยในการคัดเลือกเซลล์ที่มียีนรีพอร์ตเตอร์ lacZ ซึ่งเข้ารหัสเอนไซม์ β-galactosidase 3. การวิจัยทางจุลชีววิทยา: ใช้ในการศึกษาการทำงานของเอนไซม์ในแบคทีเรียและเซลล์ยีสต์ 4. การวินิจฉัยโรค: สามารถใช้ในการพัฒนาเทคนิคการวินิจฉัยโรคที่เกี่ยวข้องกับการทำงานของเอนไซม์ สารนี้มีความไวสูงและให้ผลลัพธ์ที่แม่นยำ ทำให้เป็นเครื่องมือสำคัญในห้องปฏิบัติการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ชีวภาพ