3',3'',5',5''-Tetraiodophenolphthalein ใช้เป็นสารเคมีในกระบวนการวิเคราะห์ทางเคมีและชีวเคมี โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทดสอบความเป็นกรด-เบส (pH) เนื่องจากสามารถเปลี่ยนสีได้เมื่ออยู่ในสภาพแวดล้อมที่แตกต่างกัน นอกจากนี้ยังมีการนำไปใช้ในการศึกษาและวิจัยทางวิทยาศาสตร์ เพื่อติดตามปฏิกิริยาเคมีหรือกระบวนการทางชีวภาพที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลง pH ในระบบต่าง ๆ