L-Leucine-p-nitroanilide ใช้หลักๆ เป็นสารตั้งต้นในงานทดสอบเอนไซม์เพื่อศึกษากิจกรรมของโปรติเอส โดยเฉพาะ leucine aminopeptidases เอนไซม์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการย่อยโปรตีนและเปปไทด์ และสารประกอบนี้ช่วยในการตรวจจับและวัดปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์ เมื่อเอนไซม์ตัดพันธะอะไมด์ใน L-Leucine-p-nitroanilide จะปล่อย p-nitroaniline ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์สีเหลือง การเปลี่ยนแปลงสีนี้สามารถวัดได้ง่ายโดยใช้สเปกโตรโฟโตเมตรี ซึ่งให้วิธีที่ตรงไปตรงมาในการตรวจสอบจลนศาสตร์และประสิทธิภาพของเอนไซม์ การประยุกต์ใช้มีนัยสำคัญในงานวิจัยชีวเคมี การพัฒนายา และการวินิจฉัยทางคลินิก ซึ่งการเข้าใจกิจกรรมของโปรติเอสเป็นสิ่งจำเป็น