3-Keto Cholesterol ใช้ในการวิจัยทางชีวเคมีเพื่อศึกษาการเมแทบอลิซึมของคอเลสเตอรอลและบทบาทของมันในกระบวนการทางชีวภาพต่างๆ มันทำหน้าที่เป็นสารกลางในการสังเคราะห์ฮอร์โมนสเตียรอยด์และกรดน้ำดี ทำให้มีคุณค่าในการทำความเข้าใจเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการเมแทบอลิซึมของลิพิด ในงานวิจัยทางเภสัชวิทยา ใช้ในการตรวจสอบกลไกของยาลดคอเลสเตอรอลและผลกระทบต่อกิจกรรมของเอนไซม์ นอกจากนี้ 3-Keto Cholesterol ยังถูกนำมาใช้ในการพัฒนาเครื่องมือวินิจฉัยสำหรับตรวจจับความผิดปกติทางเมแทบอลิซึมที่เชื่อมโยงกับความไม่สมดุลของคอเลสเตอรอล การประยุกต์ใช้ขยายไปถึงการศึกษาความเครียดจากออกซิเดชันและผลกระทบต่อสุขภาพเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในความสัมพันธ์กับผลิตภัณฑ์การออกซิเดชันของคอเลสเตอรอล