ใช้ในทางการแพทย์เพื่อเสริมสร้างกรดโฟลิกในร่างกาย โดยเฉพาะในผู้ที่มีภาวะขาดกรดโฟลิก หรือมีความต้องการสูง เช่น หญิงตั้งครรภ์เพื่อป้องกันความผิดปกติของท่อประสาทในทารกในครรภ์ นอกจากนี้ยังใช้ร่วมกับการรักษาโรคโลหิตจางจากการขาดกรดโฟลิก และอาจใช้ในผู้ที่มีความผิดปกติในการเผาผลาญกรดโฟลิก เช่น ผู้ที่มีภาวะ MTHFR mutation ซึ่งไม่สามารถแปลงกรดโฟลิกทั่วไปเป็นรูปที่ร่างกายใช้ได้ ทำให้ต้องใช้เลโวเมโฟลิกแอซิดที่เป็นรูปแบบที่ออกฤทธิ์ได้ทันที