ใช้ในงานวิจัยด้านชีวเคมีเป็นซับสเตรตสำหรับตรวจจับกิจกรรมของเอนไซม์โคลีนเอสเทอเรส โดยเฉพาะเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับอะซิทิลโคลีน เช่น อะซิทิลโคลีเนสเทอเรส ซึ่งเป็นเอนไซม์สำคัญต่อระบบประสาท เมื่อเอนไซม์ย่อยสลายสารนี้ จะปล่อย 4-ไนโตรฟีนอล ซึ่งให้สีเหลืองที่สามารถวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตรี การตอบสนองนี้มีประโยชน์สำหรับการตรวจสอบจลนศาสตร์ของเอนไซม์ การคัดกรองสารยับยั้ง และการประเมินการสัมผัสสารพิษทางระบบประสาทในตัวอย่างทางคลินิกหรือสิ่งแวดล้อม นอกจากนี้ยังใช้ในการพัฒนาเซ็นเซอร์ชีวภาพและชุดทดสอบวินิจฉัยสำหรับการตรวจจับสารประสาท เนื่องจากความไวต่อสารออร์กาโนฟอสเฟต และในการพัฒนาชุดตรวจสอบสำหรับคัดกรองสารยับยั้งเอนไซม์ ซึ่งมีความสำคัญต่อการค้นคว้ายาสำหรับโรคทางระบบประสาท เช่น โรคอัลไซเมอร์