วิตามินบี 12 ใช้ในการรักษาภาวะขาดวิตามินบี 12 ซึ่งอาจทำให้เกิดโรคโลหิตจางชนิดเม็ดเลือดแดงโตผิดปกติ (megaloblastic anemia) และปัญหาทางระบบประสาท เช่น ชา อ่อนแรง หรือสับสน วิตามินบี 12 ยังจำเป็นต่อการทำงานของระบบประสาทอย่างปกติ และการสร้างเซลล์เม็ดเลือดแดงในร่างกาย นิยมใช้ในรูปแบบฉีดหรือรับประทานเป็นเม็ด โดยเฉพาะในผู้ที่มีปัญหาการดูดซึมวิตามินจากลำไส้ เช่น ผู้ป่วยโรคแพ้กลูเตน หรือผู้ที่ผ่าตัดกระเพาะอาหาร รวมถึงผู้สูงอายุที่การดูดซึมวิตามินลดลง นอกจากนี้ วิตามินบี 12 ยังใช้เสริมในอาหารเสริมทั่วไปเพื่อช่วยเพิ่มพลังงาน ลดอาการอ่อนเพลีย และสนับสนุนสุขภาพของสมองและระบบประสาท