5-Methylumbelliferone ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายเป็นโปรบเรืองแสงในงานศึกษาทางชีวเคมีและเซลล์ มีคุณค่าอย่างยิ่งในงานทดสอบเอนไซม์ ซึ่งช่วยตรวจจับกิจกรรมของเอนไซม์ เช่น β-glucuronidase และ arylsulfatase คุณสมบัติการเรืองแสงทำให้เป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์ในการตรวจสอบปฏิกิริยาเอนไซม์แบบเรียลไทม์ นอกจากนี้ ยังถูกนำมาใช้ในงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งและการอักเสบ เนื่องจากถูกศึกษาในศักยภาพในการยับยั้งการสังเคราะห์ hyaluronan ซึ่งมีบทบาทในความเจริญเติบโตของเนื้องอกและการแพร่กระจาย ในด้านโรคผิวหนัง ถูกสำรวจสำหรับผลในการทำให้ผิวขาวขึ้น เนื่องจากความสามารถในการยับยั้งกิจกรรม tyrosinase นอกจากนี้ ยังทำหน้าที่เป็นบล็อกการสร้างในการสังเคราะห์สารประกอบอินทรีย์ต่างๆ และยา