4′,5′-ดิบรอมโมฟลูออเรสเซอินถูกใช้หลักๆ เป็นสีย fluores cent ในแอปพลิเคชันทางชีวภาพและเคมีต่างๆ โดยทั่วไปใช้ในกล้องจุลทรรศน์และ flow cytometry เพื่อย้อมสีเซลล์และเนื้อเยื่อ ทำให้สามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence สียังถูกนำมาใช้ในชีววิทยาโมเลกุลสำหรับการติดฉลากกรดนิวคลีอิกและโปรตีน สนับสนุนการศึกษาความโครงสร้างและหน้าที่ของ它们 นอกจากนี้ ยังทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ pH ในขั้นตอนการวิเคราะห์บางประการ โดยเปลี่ยนสีตอบสนองต่อการเปลี่ยนแปลงของ pH ความ fluores cent ที่สว่างสดใสทำให้มีคุณค่าต่อการทดสอบวินิจฉัยและการศึกษาวิจัยที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการของเซลล์