ใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวเคมีเพื่อศึกษาการถ่ายโอนพลังงานในเซลล์ สารประกอบนี้ทำหน้าที่เป็นซับสเตรตในงานทดสอบเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับคินาส, ATPases และเอนไซม์อื่นๆ ที่ขึ้นกับ ATP มีความสำคัญในชีววิทยาโมเลกุลสำหรับปฏิกิริยาการฟอสฟอรีเลชันในหลอดทดลองและการกระตุ้นโปรตีน ใช้บ่อยในระบบเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อตรวจสอบเส้นทางสัญญาณ โดยเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับตัวรับเพอรีนเออร์จิก (purinergic receptors) ยังใช้ในการศึกษาฟังก์ชันของไมโตคอนเดรียและการควบคุมเมแทบอลิซึม ในชุดตรวจวินิจฉัยบางชนิด มันทำหน้าที่เป็นรีเอเจนต์สำหรับงานทดสอบการเรืองแสงชีวภาพ (bioluminescent assays) โดยใช้ระบบลูซิเฟอริน-ลูซิเฟอเรสสำหรับการตรวจจับการเรืองแสงที่ขึ้นกับ ATP อย่างอ่อนไหว รูปแบบเกลือ tris ของมันช่วยเพิ่มความละลายและความเสถียรในสารละลายบัฟเฟอร์ ทำให้เหมาะสมสำหรับการใช้งานที่ pH สรีรวิทยา