ใช้เป็นสารตั้งต้นในการตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ β-galactosidase โดยเมื่อเอนไซม์ย่อยสลายสารนี้จะปลดปล่อย 4-methylumbelliferone ซึ่งเรืองแสงภายใต้แสง UV ทำให้สามารถวัดกิจกรรมของเอนไซม์ได้อย่างแม่นยำและไวมาก นิยมใช้ในงานวิจัยทางชีววิทยาโมเลกุล เช่น การรายงานการแสดงออกของยีนที่ควบคุมด้วยโปรโมเตอร์ lac โดยเฉพาะในระบบแบคทีเรีย เช่น E. coli นอกจากนี้ยังใช้ในระบบตรวจวัดเอนไซม์ในเซลล์สัตว์หรือจุลินทรีย์อื่น ๆ ที่ผลิต β-galactosidase อีกทั้งเหมาะสำหรับการใช้งานใน assay แบบ high-throughput เนื่องจากให้สัญญาณเรืองแสงที่ชัดเจนและตรวจจับได้ง่าย